畜牧兽医学报

作者：宋鹏琰, 李佳丽, 苗艳平, 李相运, 周荣艳, 锡建中

单位：河北农业大学动物科技学院, 保定 071001

基金：河北省高等学校科学技术研究青年基金项目（QN2015162）；河北省首批青年拔尖人才支持计划（2016-2018）；河北农业大学青年学术带头人支持项目（2015-2017）；河北省自然科学基金项目（C2019204039）

旨在对绵羊miR-150基因的启动子进行鉴定以及探索生殖激素对miR-150启动子转录调控的影响。本研究利用生物学软件预测雌性绵羊（小尾寒羊）卵巢miR-150启动子区域及繁殖相关转录因子结合位点，构建重组质粒，并利用双荧光素酶报告基因检测miR-150的启动子活性。通过在无血清培养基内添加FSH、LH和E2，进行miR-150启动子重组质粒转染并检测miR-150启动子活性。结果，分别利用Promoter 2.0和PROMO软件预测出miR-150启动子区域和转录起始位点，并获得了与繁殖相关转录因子结合位点。所预测的绵羊miR-150启动子片段序列长度为582 bp，且成功构建miR-150启动子质粒，并确定绵羊颗粒细胞的最佳转染效率（脂质体∶质粒DNA=1∶1）和质粒最佳转染比例（50∶1），从而验证了所预测的区域具有启动子活性。此外，FSH、LH和E2处理组与对照组（无激素组）相比，miR-150启动子的活性均显著下调（P<0.05）。结果表明，生殖激素可以通过影响绵羊miR-150启动子活性来调控miR-150基因的表达，为miR-150调控卵泡发育的机制研究提供了新思路。

来源：2019年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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