畜牧兽医学报

作者：方娟, 陈指龙, 黎陈, 张逢, 伍小松, 杨青

单位：1. 湖南农业大学动物医学院, 长沙 410128;2. 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙 410128

基金：国家自然科学基金（31272630；31772819；31572591）

研究猪伪狂犬病病毒（PRV）-YY株感染对宿主细胞增殖和热休克蛋白（HSP）27、70和90表达的影响。用Reed-Muench法测定PRV-YY滴度后，用不同病毒量感染PK-15细胞，采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖，并用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和免疫印迹试验（Western blot）分别检测感染后细胞中病毒核酸含量及三种HSPs mRNA和蛋白质表达的变化。结果表明，当用80 TCID50和100 TCID50的病毒量（滴度为106TCID50·0.1 mL-1）感染细胞时，在所监测的时间内细胞指数均显著低于对照组；当感染60 h时，除10 TCID50感染组外，其余各组的细胞指数均极显著低于对照组（P<0.01）；用10 TCID50病毒感染细胞60 h时，细胞中病毒核酸含量达峰值；当病毒黏附结束即感染0 h时，HSP70和90 mRNA的转录升高（P<0.01），两者分别在感染6、12 h后表达降低（P<0.01），而HSP27在感染0 h升高（P<0.05），3 h时极显著高于对照组（P<0.01），但在感染48 h后其表达降低；PRV感染细胞后三种HSP蛋白的变化趋势基本与其mRNA水平的变化类似（部分时间点不同）。结果表明，一定滴度的PRV可显著抑制PK-15细胞的增殖，PRV感染可诱导PK-15细胞迅速发生应激反应，使HSP27、70和90表达快速升高，三种HSP的快速应答可能在保护细胞免受PRV-YY的感染损伤起着重要作用。

来源：2019年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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