畜牧兽医学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-1985/S

国际刊号:0366-6964

畜牧兽医学报杂志2019年第6期:犬细小病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

发布日期:

作者:秦彤, 周灵, 由欣月, 梁琳, 史利军, 张建伟, 李金祥, 崔尚金

单位:1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;2. 农业部兽用药物与诊断技术北京科学观测实验站, 北京 100193;3. 北京市畜牧总站, 北京 100107;4. 中国农业科学院, 北京 100081

基金:中国农业科学院创新工程项目(ASTIP-IAS15);中国农业科学院基本科研业务费(2018-YWF-YTS-16);“十三五”国家重点研发计划(2016YFD0501003;2017YFD0501603)

为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPV VP2基因保守序列设计一对能扩增574 bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对其特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,所建立的纳米PCR特异性和灵敏性良好,最低核酸检出量为2拷贝·μL-1,其敏感性比常规PCR高1 000倍。分别采用纳米PCR和常规PCR,对广西、北京、吉林送检的75份疑似CPV的临床样品进行检测,CPV阳性率分别为89.3%(67/75)和70.7%(53/75),表明该方法具有更高的敏感性,适用于CPV低含量临床样品的检测。本方法的建立为CPV感染的早期快速、灵敏、准确的诊断提供了新方法,为CPV的防控奠定基础,具有重大的临床应用意义和价值。

来源:2019年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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