畜牧兽医学报

作者：陈祥兴, 李蛟龙, 邢通, 张林, 高峰

单位：1. 南京农业大学动物科技学院, 江苏省动物源食品生产与安全保障重点实验室, 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心, 南京 210095;2. 淄博市畜牧渔业服务中心, 淄博 255000

基金：国家自然科学基金（31872374）

旨在以体外培养的小鼠成肌细胞（C2C12）为研究对象，探讨氧化损伤可能的路径。本试验分为3个处理组，每个处理组6个重复。处理组分别为：对照组（Control），以DMEM培养基培养的细胞作为空白对照，培养24 h；吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）组（PDTC），以每个孔1 mL的PDTC（20 μmol·L-1）孵育细胞24 h；H2O2组（H2O2），加入0.5 mmol·L-1的H2O2处理细胞24 h。检测各组细胞的存活率、ROS水平与凋亡率，采用荧光定量PCR和蛋白免疫印记法检测细胞凋亡和自噬相关基因的表达以及NF-κB信号通路相关因子的表达。结果表明，与对照组相比，PDTC可显著提高细胞的总凋亡率（P<0.05），可显著上调细胞半胱天冬蛋白酶-3（caspase-3）、caspase-6、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平（P<0.05），显著上调Beclin 1的mRNA表达量和微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/I的值以及LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05），显著下调核因子kappa B副族1（p50）、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白（Bcl-2）、v-rel禽网状内皮增生病病毒癌基因同源物A（RelA）和环氧合酶（Cox）-2的mRNA表达量以及NF-κB蛋白表达水平（P<0.05）；H2O2可显著提高细胞的ROS水平和细胞总凋亡率（P<0.05），可显著上调caspase-3、caspase-6、caspase-8、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平（P<0.05），显著上调Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-I的mRNA表达量以及LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05），显著提高Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA表达量（P<0.05），显著下调p50、Bcl-2、RelA和Cox-1、Cox-2的mRNA表达量以及核因子kappa B（NF-κB）蛋白表达水平（P<0.05）。结果提示，H2O2会引起C2C12细胞的ROS升高，并且能够通过抑制NF-κB信号通路介导细胞凋亡和自噬的发生，这与NF-κB因子的特异性抑制剂PDTC的作用相类似。

来源：2019年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2019年第5期