畜牧兽医学报

作者：刘豪丽, 滕蔓, 李会珍, 余祖华, 刘金玲, 丁轲, 张改平, 罗俊

单位：1. 河南科技大学动物科技学院, 动物疫病与公共卫生重点实验室, 洛阳 471003;2. 河南省农业科学院动物免疫学 重点实验室, 农业部动物免疫学重点实验室, 河南省动物免疫学重点实验室, 郑州 450002;3. 河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002;4. 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患防控协同创新中心, 扬州 225009

基金：国家自然科学基金（31602050；U1604232）；中原千人计划-中原基础研究领军人才；河南省农业科学院杰出青年科技基金（2019JQ01）；河南省农业科学院科研发展专项资金（2019CY012）

作为α疱疹病毒的重要成员，马立克病病毒（MDV）感染鸡可引起免疫抑制及快速发作的T细胞淋巴瘤，即马立克病（MD）。此前发现MDV基因组编码大量病毒miRNA，可能在病毒复制、潜伏感染及肿瘤发生中起重要作用。基因敲除miR-M11-5p可显著增强MDV致病性及致瘤性，表明其可能是MD肿瘤抑制因子。为进一步揭示miR-M11-5p介导的调控机制，本研究利用鸡胚成纤维细胞（CEF）总RNA的cDNA为模板，通过hybrid-PCR扩增miR-M11-5p的候选宿主靶基因片段，然后连接至pMD19-T载体、转化至E.coli JM109中构建cDNA文库。对文库菌落进行PCR鉴定、测序分析以及Blast序列对比，共获得77个候选宿主靶基因，其中37个miRNA结合靶点位于候选靶基因的3'-UTR中。进一步通过双荧光素酶报告试验、miR-M11-5p过表达以及RT-qPCR分析，最终鉴定鸡MAFB、LOC776816和RFX7为miR-M11-5p的宿主靶基因。本研究为进一步阐明miR-M11-5p在MDV肿瘤发生中的调控机制奠定了重要基础。

来源：2019年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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