畜牧兽医学报

作者：郭紫晶, 何琪富, 汤承, 张斌, 岳华

单位：1. 西南民族大学生命科学与技术学院, 成都 610041;2. 国家民委青藏高原动物疫病防控创新团队, 成都 610041

基金：“十三五”国家重点研发计划课题（2016YFD0500907）；国家民委“青藏高原动物疫病防控创新团队”（13TD0057）

纽布病毒（nebovirus，NeV）是国内新发的犊牛腹泻病原，本试验目的是建立检测NeV的real-time RT-PCR方法。根据国内NeV流行株的聚合酶基因（RdRp）序列设计引物，通过反应条件和体系优化，成功建立基于TB Green检测NeV的real-time RT-PCR方法。结果显示：该方法在2.9×101~2.9×109copies·μL-1之间呈现良好的线性关系，线性相关系数R2=0.999 4，扩增效率为98%；该方法只特异性检出NeV，不检出常见无关病原；最低检测下限为29 copies·μL-1；批内和批间的变异系数分别为0.89%~1.89%和0.83%~1.15%；该方法对临床样本的检出率高于文献报道的三种检测方法（P<0.05）。对2018年8-11月采自新疆和辽宁的135份奶犊牛腹泻样本中NeV的检出率为67.41%，场阳性率为100%（15/15）。所建方法的特异性和稳定性好、灵敏度高，为NeV的检测和流行病学调查提供了有力的手段。

来源：2019年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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