畜牧兽医学报

作者：李兰会, 杜小龙, 王麒, 葛琳涵, 张乐超, 李雪梅, 李祥龙

单位：1. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071001;2. 河北科技师范学院, 秦皇岛 066600;3. 河北省牛羊胚胎工程技术研究中心, 保定 071000

基金：河北省自然科学基金项目（C2015204176）

旨在克隆获得水貂DCT基因5'UTR序列并分析其结构特征，预测转录调控元件并检测启动子活性，为探究DCT基因在调控水貂毛皮颜色形成中的作用提供理论依据。本研究利用PCR扩增黑貂、白貂和咖啡貂DCT基因5'UTR，构建咖啡貂DCT基因5'UTR的pGL3-1~pGL3-7和黑貂pGL3-4~pGL3-6缺失片段的荧光素酶报告基因重组质粒，检测各片段的启动子活性；利用亚硫酸氢盐法检测3种毛色水貂DCT基因启动子区CpG岛甲基化水平。结果，克隆获得水貂DCT基因长8 203 bp的5'UTR序列，发现g.7133-7336为长204 bp的转座元件，与其高相似度的100条序列中，一条为蜕皮动物总门线虫纲的索巴利吸虫，其他均来自犬形亚目。P3和P4片段具有显著的启动子活性（P<0.05）；咖啡貂的CpG岛甲基化水平显著高于黑貂和白貂（P<0.05）；咖啡貂CC单倍型启动子活性显著低于黑貂的TT单倍型片段（P<0.05）。结果表明，水貂DCT基因5'UTR长204 bp的犬形亚目特异短散在元件Can-SINEs由蜕皮动物门的索巴利吸虫侵入动物基因组形成；基因上游32 bp元件和近端域共同作用发挥启动子活性，而GC-box和CpG岛结构沉默水貂DCT基因启动；g.-684和g.-621位点的T > C突变形成的CC单倍型导致咖啡貂DCT基因的高甲基化与低启动子活性，从而抑制真黑素合成，产生咖啡色被毛特征。

来源：2019年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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