畜牧兽医学报

作者：李占鸿, 王金萍, 杨恒, 廖德芳, 宋建领, 高林, 何于雯, 李华春

单位：云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室, 昆明 650224

基金：国家自然科学基金（31360621；31760744）；公益性行业（农业）科研专项（201303035）；云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目（2017HB055）

旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒（BTV），掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚-C6/36细胞-BHK-21细胞"接种的方式，采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离；采用血清中和试验以及Segment 2与Segment 6 ORF区的克隆测序确定分离病毒的血清型；通过病毒噬斑形成和增殖曲线的测定，分析病毒在BHK-21细胞的增殖特性；通过qRT-PCR与血清中和试验分析BTV感染动物血液中病毒含量与中和抗体动态变化情况。结果显示：2013年8月，在云南芒市设定的哨兵牛中分离出一株BTV（毒株号V013/YN/2013），血清中和试验显示V013/YN/2013为BTV-9型病毒，Segment 2与Segment 6序列分析表明分离的病毒属BTV-9 Eastern型，与日本毒株和澳大利亚BTV-9型毒株具有最近的亲缘关系。病毒噬斑与增殖曲线测定结果显示V013/YN/2013在BHK-21细胞上增殖能力明显强于BTV-9型参考毒株。自然感染V013/YN/2013的牛在连续5个月的监控期内未出现临床症状，感染动物虽产生了特异性中和抗体，但血液中始终能持续检测到病毒核酸。本研究首次报道了BTV-9 Eastern型毒株V013/YN/2013在我国的分离，为进一步开展中国BTV-9型病毒的全基因组测序、诊断方法的建立、流行病学调查与致病性研究奠定了基础。

来源：2019年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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