畜牧兽医学报

作者：陈瑞, 朱子凤, 黄坚, 杨晓农

单位：1. 西南民族大学生命科学与技术学院, 成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部和四川省重点实验室, 成都 610041;3. 成都惠泰生物医药有限公司, 成都 610041;4. 西南民族大学校医院, 成都 610041

基金：国家重大支撑项目课题（2014BAD13B03）；西南民族大学研究生学位点建设项目（2014XWD-S0906）

为了研究新西兰白兔矮小同源盒基因（Shox2）序列，预测其结构和功能，以及研究Shox2基因的时空表达特征，本研究克隆了新西兰白兔Shox2基因全长CDS区，分析其编码蛋白的同源性、亲疏水性、二级和三级结构特点、系统进化树等生物信息学特征，并用Western blot法验证融合蛋白TrxA-Shox2。分别在胚胎中期（E20.5 d）、胚胎后期（E28.5 d）、幼龄期（出生后10 d）、成年期（A）4个时间点采集3只动物的肾、大血管、真皮、心、大脑、肝、肺、脾、肌肉、胆囊共10种组织，采用实时荧光定量PCR技术研究Shox2基因的时空表达图谱。结果，成功克隆了新西兰白兔Shox2基因（登录号：KP726285）。Shox2基因CDS区全长666 bp，翻译221个氨基酸。生物信息学分析显示，Shox2为碱性、不稳定蛋白，Shox2蛋白氨基酸二级结构中α-螺旋区域占61.99%，无规则卷曲区域占33.48%，延伸链占4.52%。Western blot验证了融合蛋白TrxA-Shox2的表达。家兔Shox2蛋白氨基酸序列与眼镜猴、猩猩、褐家鼠、人的氨基酸序列同源性较高，说明Shox2蛋白在进化中较保守。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达，在E20.5 d的家兔胚胎中，Shox2 mRNA在肾、肌肉和胆囊的表达量高，在E28.5 d时表达量较高的是脾、心，幼龄期时表达量较高的是真皮、肝，成年期时表达量较高的是真皮、脾。本研究成功克隆了新西兰白兔Shox2基因，预测了其结构和功能。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达，不同的组织和不同时间特征的表达量变化可能与Shox2功能高度相关，并受到严格的调控。

来源：2019年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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